РАЗРАБОТКА ПЦР ТЕСТ-СИСТЕМЫ ДЛЯ ИНДИКАЦИИ НЕТУБЕРКУЛЕЗНЫХ МИКОБАКТЕРИЙ В БИОЛОГИЧЕСКИХ ОБРАЗЦАХ И ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЕ
УДК: 619:615.47:579.873.21 DOI: 10.31588/2413_4201_1883_4_260_200
Ключевые слова:
ПЦР-РВ, разработка тест-системы, нетуберкулезные микобактерии, неспецифические туберкулиновые реакции, дифференциальная диагностикаАннотация
Микобактерии, не входящие в туберкулезный комплекс, нетуберкулезные микобактерии (НТМБ), широко распространены в экологических резервуарах, у различных видов домашних и диких животных, в почве и других объектах внешней среды. Установлено значительное влияние НТМБ в проявлении неспецифических реакций на ППД-туберкулин у крупного рогатого скота, что приводит к необоснованному убою реагирующих животных, дополнительным затратам на дифференциальную диагностику, потере приплода и продукции животных, а также к огромным расходам на ветеринарно-санитарные мероприятия. В связи с этим создание тест-системы для скрининга объектов окружающей среды, контаминированных НТМБ, и выявления животных-бактерионосителей является актуальным. При разработке тест-системы применены современные молекулярно-биологические методы, с помощью которых были определены, сконструированы и синтезированы видоспецифичные для наиболее распространенных НТМБ пары праймеров и зонды. Для постановки ПЦР РВ оптимизированы температурный режим и соотношения компонентов реакционной смеси. Разработанная тест-система проверена по параметрам специфичности и чувствительности с использованием ДНК референтных штаммов M. avium, M. paratuberculosis, M. fortuitum, M. intracellulare, M. smegmatis, M. scrofulaceum и M. kansasii. Результаты исследований по конструированию тест-системы легли в основу проекта инструкции по ее применению для выявления ДНК НТМБ в биологических материалах и объектах окружающей среды методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме «реального времени» «НТМБ ПЦР-РВ».
Литература
Баратов, М. О. Распространение нетуберкулезных микобактерий в объектах эпизоотологического надзора в республике Дагестан / М. О. Баратов // Ветеринария сегодня. – 2023. – Т. 12. – № 2. – С. 140-146.
Камалиева, Ю. Р. Идентификация микобактерий нетуберкулезного типа, изолированных от крупного рогатого скота в Республике Татарстан / Ю. Р. Камалиева, Д. Н. Мингалеев, Р. Х. Равилов // Аграрная наука. – 2021. – Т. 354. - №11–12. – С. 32-35.
Камалиева, Ю. Р. Идентификация микобактерий нетуберкулезного типа, изолированных с объектов внешней среды в Республике Татарстан / Ю. Р. Камалиева, Д. Н. Мингалеев, Р.Х. Равилов // Ученые записки КГАВМ им Н.Э. Баумана. – 2021. – Т. 248 (IV). – С. 100-105.
Москвичева, А. В. Гель-фильтрация продуктов экстракции клеточного дебриса Mycobacterium bovis / А. В. Москвичева, А. Р. Валеева, А. Б. Третьякова, М. О. Коровина, Г. Г. Казарян // Ветеринарный врач. – 2022. – №6. – С. 37 - 47.
Москвичева, А. В. Сравнительный анализ белковых профилей Mycobacterium bovis и Mycobacterium tuberculosis: ключевые аспекты / А. В. Москвичева, А. Р. Валеева, Г. Г. Казарян, К. С. Хаертынов [и др.] // Ветеринария и кормление. – 2023. – № 7. – С.51 - 53.
Муковнин, А. А. Туберкулез крупного рогатого скота в России / А. А. Муковнин, А. Х. Найманов, А. М. Гулюкин // Ветеринария. – 2020. – № 7. – С. 19-23.
Найманов, А. Х. Симультанная туберкулиновая проба для отбора реагирующих животных и установления диагноза на туберкулез / А. Х. Найманов, Г. И. Устинова, Е. П. Вангели, О. Д. Кучерук [и др.] // Ветеринария. – 2020. – № 4. – С. 3-6.
Gomez-Buendia, A. Non-tuberculous mycobacteria: occurrence in skin test cattle reactors from official tuberculosis-free herds / A. Gomez-Buendia, J. Alvarez, J. Bezos, J. Mourelo, J. Amado, J.L. Saez, L. de Juan, B. Romero // Front Vet Sci. – 2024. – 11:1361788. – doi: 10.3389/fvets.2024.1361788.
WHO's global TB database. [Электронный ресурс] http://www.who.int/tb/country/data/download/en/. (Дата обращения: 21.10.2022 г.).
Baratov, M. O. Distribution of non-tuberculous mycobacteria in objects of epizootological surveillance in the Republic of Dagestan / M. O. Baratov // Veterinary Science Today. – 2023. – Vol. 12. – No. 2. – P. 140-146.
Kamalieva, Yu. R. Identification of non-tuberculous mycobacteria isolated from cattle in the Republic of Tatarstan / Yu. R. Kamalieva, D. N. Mingaleev, R. Kh. Ravilov // Agrarian Science. – 2021. – Vol. 354. - No. 11–12. – P. 32-35.
Kamalieva, Yu. R. Identification of non-tuberculous mycobacteria isolated from environmental objects in the Republic of Tatarstan / Yu. R. Kamalieva, D. N. Mingaleev, R.Kh. Ravilov // Scientific notes of KSAVM named after N.E. Bauman. – 2021. – Vol. 248 (IV). – P. 100-105.
Moskvicheva, A. V. Gel filtration of extraction products of Mycobacterium bovis cell debris / A. V. Moskvicheva, A. R. Valeeva, A. B. Tretyakova, M. O. Korovina, G. G. Kazaryan // Veterinary Doctor. – 2022. – No. 6. – P. 37-47.
Moskvicheva, A. V. Comparative analysis of protein profiles of Mycobacterium bovis and Mycobacterium tuberculosis: key aspects / A. V. Moskvicheva, A. R. Valeeva, G. G. Kazaryan, K. S. Khaertynov [et al.] // Veterinary Medicine and Feeding. – 2023. – No. 7. – P. 51-53.
Mukovnin, A. A. Tuberculosis of cattle in Russia / A. A. Mukovnin, A. Kh. Naimanov, A. M. Gulyukin // Veterinary Medicine. – 2020. – No. 7. – P. 19-23.
Naimanov, A. Kh. Simultaneous tuberculin test for selection of reacting animals and diagnosis of tuberculosis / A. Kh. Naimanov, G. I. Ustinova, E. P. Vangeli, O. D. Kucheruk [et al.] // Veterinary Medicine. – 2020. – No. 4. – P. 3-6.
Gomez-Buendia, A. Non-tuberculous mycobacteria: occurrence in skin test cattle reactors from official tuberculosis-free herds / A. Gomez-Buendia, J. Alvarez, J. Bezos, J. Mourelo, J. Amado, J.L. Saez, L. de Juan, B. Romero // Front Vet Sci. – 2024. – 11:1361788. – doi: 10.3389/fvets.2024.1361788.
WHO's global TB database. [Electronic resource] http://www.who.int/tb/country/data/download/en/. (Date of access: 21.10.2022).
